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DNase I柱上消化试剂盒(离心柱型)(Rnase free,RNA提取过程中清除gDNA残留)

任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留,本公司的RaPure™系列RNA提取产品,由于采取了本公司独特的缓冲体系和特殊硅胶吸附膜,可以去除绝大多数的DNA污染,所以一般不用进行DNase I 消化。但是对于一些敏感的下游实验,需要去除微量的DNA残留,可以购买本公司DNase I柱上消化DNA试剂盒(RNase free),直接在离心吸附柱上面消化残留的DNA,然后纯净RNA可以洗脱下来直接使用。本产品兼容所有硅胶膜离心柱式RNA提取试剂盒残留DNA纯化,纯化后的高纯总RNA反转录时不用清除DNA直接用于qPCR等实验。

产品编号:2127

产品规格:50次/200次

产品价格:350/1330

包装:

储存条件:4℃

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DNase I柱上消化试剂盒(离心柱型)(Rnase free,RNA提取过程中清除gDNA残留)

DNase I SpinColumn DNA Erasion Kit


包装规格:

2127A DNase I柱上消化试剂盒(离心柱型)(Rnase free,RNA提取过程中清除gDNA残留) 50次 350元
2127B DNase I柱上消化试剂盒(离心柱型)(Rnase free,RNA提取过程中清除gDNA残留) 200次 1330元


一.产品储存:
   DNase Buffer -20 ℃保存, 去蛋白液RW1常温或者4 ℃保存,RNase free DNase-20 ℃保存,避免反复冻融。

二.产品介绍:
   任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留,本公司的SpinFast系列RNA提取产品,由于采取了本公司独特的缓冲体系和特殊硅胶吸附膜,可以去除绝大多数的DNA污染,所以一般不用进行DNase I 消化。但是对于一些敏感的下游实验,需要去除微量的DNA残留,可以购买本公司DNase I柱上消化试剂盒(RNase free),直接在离心吸附柱上面消化残留的DNA,然后纯净RNA可以洗脱下来直接使用。本产品兼容所有硅胶膜离心柱式RNA提取试剂盒。

三.产品特点:
1.简单快速,条件经过优化,一般15分钟可以消化清除硅胶膜上残留DNA。
2.确保RNase free, 可以保证RNA分子完整性。
3.兼容性广,可整合进所有硅胶膜离心柱式RNA提取试剂盒柱上消化,不需要提取到总RNA后再单独去除里面的残留DNA。
  

注意事项:
      DNase是非常敏感,易物理损坏变性丧失活性,所以不要漩涡混匀DNase I和工作液。轻轻吹打或者上下颠倒混匀混合液。每次在抽提RNA抽提前配置新鲜的工作液。DNase I buffer是和RNase-free DNase I配套专门用于柱上消化,一般的10 x DNase buffer 并不能用于膜上的DNase 消化,不能替代。

四.操作步骤:
1.按照正常RNA提取步骤操作,裂解混合物过柱离心完全后(RNA包括残留DNA吸附到离心柱硅胶膜上),加入去蛋白液RW1步骤前按照以下步骤操作。

2.取一个新的1.5ml离心管,加入45μl DNase I buffer和5μl RNase free DNase I,轻轻吹打混匀成DNase I工作液(处理多个离心柱子要按照比例放大制备工作液)。置冰上备用。


注:如果残留DNA过多导致消化不完全,可按比例加大使用酶量来提高消化效果(如90μl DNase I buffer和10μl RNase free DNase I)。

3.向吸附柱RA 中加入350μl去蛋白液RW1,12,000 rpm 离心30 秒,弃废液,将吸附柱放回收集管中。

4.向吸附柱RA 中央加入50μl 的DNase I 工作液,室温(20-30℃)放置15 分钟。注意直接将工作液滴在膜中央上,不要让工作液滴在O型圈或是离心柱管壁上。

5.向吸附柱RA 中加入350μl去蛋白液RW1, 12,000 rpm 离心30-60 秒,弃废液,将吸附柱放回收集管中。

6.接漂洗液RW步骤等后续步骤。如果是其它公司试剂盒,则接最后的一个漂洗液漂洗等后续步骤。


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根据具体样品数量,组织RNA提取难度,酌情收取少量RNA提取费用,内参免费;



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2. 专业的引物设计技能,保证qPCR引物的特异性;

3. 熟练的qPCR操作技能,保证完美的qPCR结果;

qPCR实验流程图

送样要求:

1. 细胞(≥106 )、新鲜动植物组织(≥300mg)、血液(≥1ml)、叶片(≥100mg)等样品材料,基因组DNA或总RNA(总RNA>2μg,体积≥20μl,浓度≥100 ng/μl)。
2. 靶基因信息和背景资料:基因序列或GenBank Accession Number等,生物物种信息(Human、Mouse、Rat 等)、DNA/RNA 来源、基因丰度等。

提供服务:
引物探针设计合成,RNA提取,反转录,RNA电泳,引物筛选,上机定量检测。

提交结果:
原始数据(CT值和各种统计值,融化温度图,扩增曲线图,电泳图,柱状图)、数据分析结果及详细实验报告。