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Southern blot印迹杂交检测-DIG探针标记技术服务

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一、服务介绍:

Southern印迹杂交(Southern blot)是1975年由英国人southern创建,是研究DNA图谱的基本技术,在遗传病诊断、DNA图谱分析及PCR产物分析等方面有重要价值。


Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的方法。其原理为利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上,经干烤或者紫外线照射固定,再与相对应结构的DIG标记探针进行杂交,用放射自显影或酶反应显色,从而检测特定DNA分子的含量。


本公司使用最先进的自动化学发光成像检测系统进行曝光,确保捕获最佳信噪比的成像时间点,获得较高质量的图片,图片可以直接用于SCI论文发表使用,达到国际期刊的要求。 

  本公司的Southern杂交技术可以检测各种动物植物 微生物的基因组片段,探针的制作使用DIG(地高辛)标记,具有标记效率高,背景噪音少、无放射性污染的特点。本公司在实验过程中保留原始数据,原始照片和实验材料,数据真实可信,具有可重复性。


服务流程:
1.基因组DNA提取(单独收费)
2.探针设计合成(单独收费)
3.DIG探针标记
4.Southern杂交检测
5. 提交给您电子版检测报告,包括详细操作程序和实验结果等


二、服务报价:

服务项目 内容说明 价格 周期
基因组DNA提取 获得高纯50µg基因组DNA ¥300/样品 1周
DNA探针设计合成 引物设计、合成及验证 ¥600/基因 1-2周
DIG探针标记及Southern Blot检测 标记一条探针,杂交一张膜,每张膜(1-8个样品) ¥8000/膜 3-4
重复杂交 标记一条探针,杂交已有的膜。 4000/ 1-2

Southern Blot检测,如果重复2次实验仍结果不理想(背景深等),将收取5000元/膜的基础费用。
重复杂交,如果重复2次实验仍结果不理想(背景深等),将收取3000元/膜的基础费用。


三、客户提供材料:

1.用于实验,Southern杂交的高质量DNA样品质量至关重要,决定实验的结果的成败。建议委托本公司提取,以便于提高效率节省时间。

2.基因组DNA检测:OD260/OD280=1.8-2.0,基因组要求DNA总量不小于60ug,浓度大于500ng/uL;客户需要提供基因组DNA检测图片以及NANO Drop 2000等检测仪的检测结果,要求无降解,无蛋白污染,电泳检测标准请参考。

3.检测样品低温运输至公司,最可靠选择干冰,顺风快递运输。

4.客户需提供用于杂交的目标基因序列和含有待杂交基因的阳性质粒(50uL以上),我们会依据Southern blot实验要求重新选择全长或部分区域作为探针序列,标记地高辛探针。

5.客户如果无法提供高品质的,达到实验要求的基因组DNA样品,本公司可以帮助制备可用于Southern Blot检测的DNA样品,客户需要提供足够量的组织样品,细胞样品或者菌液样品(建议干冰顺丰快递运输)。

6.客户需要选择合适的DNA内切酶将基因组DNA片段化,即弥散化结果。如果实验需要用到非常规的限制性内切酶或者需要本公司进行选择,需额外加收酶切费用和设计费用,并且客户需提供 实验中用到的一系列基因序列信息。 


四、实验流程:

1.制备待测DNA

2.DNA限制酶消化 

3.琼脂糖凝胶电泳分离待测DNA样品 

4.电泳凝胶预处理

5.转膜

6.探针标记 

7.预杂交

8.Southern杂交

9.洗膜

10.放射性自显影检测 

11.实验结果分析及报告

 

五、提供结果:

本公司负责对客户提供样品进行DIG探针标记与Southern杂交检测技术服务,最终提供检测报告及检测图片。

1、DNA样品检测报告(实验样品不返还,请注意保留备份)

2、标准实验流程报告

3、southern blot实验结果检测报告

4、如果是实验有额外的要求,请提前致电或邮件进行沟通说明。