技术服务

MicroRNA（miRNA）是一类长度约19-24nt的非编码单链RNA，通过碱基互补配对的方式与靶基因的3’-UTR区部分或完全互补，剪切靶基因的转录产物或者抑制转录产物的翻译，从而起到转录后调控靶基因表达的作用。它广泛存在于动物、植物、真菌及病毒的基因组中，调控生物体生长发育和疾病发生等过程中相关基因的表达。MiRNA的异常表达可能会导致生理状态的异常和疾病的产生，在多种癌症中，miRNA的表达水平会发生明显改变，有可能起到原癌基因和抑癌基因的作用。此外，在许多其他的病变组织和细胞中也检测到了miRNA的异常表达。因此对miRNA的表达的研究具有重要意义。

服务项目
1．MicroRNA的实时定量PCR（Real-time quantitative PCR）检测运用成熟的实时定量PCR技术准确、快速地定量检测各种组织、原代细胞及细胞系中目的microRNA的表达情况，具有灵敏度高、实验周期短和特异性高等特点，实验结果见图1和图2。

2．MicroRNA Array
利用集成在384孔板上的引物和探针组合来检测人类、大鼠或小鼠的miRNA表达谱，只需1个工作日就能产生覆盖Sanger miRBase的综合数据集。采用TaqMan探针原理，结果准确可靠，样品无需做重复试验。
 
3．特定类型疾病miRNA表达检测
MiRNA的表达检测对监测肿瘤的发生发展和各种治疗手段的效果有重要意义，作为指导个体化药物选择的生物标记具有很大的临床应用潜力。我们针对肝癌、胃癌、胰腺癌等多种肿瘤相关标志性miRNA进行荧光定量检测。

实验步骤：
1.设计合成引物或Taqman探针
2.总RNA提取和质检
3.反转录
4.qPCR检测
5.数据分析

送样要求：
细胞（≥106）、组织（≥300mg）、血液（≥1ml）、血清（≥1.5ml）等样品材料，总RNA（≥20μl，浓度≥ 50ng/μl）。 同时提供待测基因序列或基因名称。

提交的结果：
引物（或探针）及序列、反转录胶图、原始qRT-PCR数据和实验报告。