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通用植物RNA提取试剂盒(离心柱型)(DNase I)

通用植物RNA提取试剂盒,适用于水稻、玉米、小麦、拟南芥、番茄、烟草和一般多糖多酚如棉花、冬青等植物。无需有毒的苯酚/氯仿抽提,乙醇沉淀等步骤,操作步骤少,RNA提取速度快,无杂质残留,DNase I柱上消化DNA,适合于对纯度要求很高的下游实验,如real-time RT-PCR和RNA-Seq。

产品编号:2116

产品规格:50次/200次

产品价格:1290/4900

包装:

储存条件:4℃

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通用植物RNA提取试剂盒(DNase I)

Universal Plant RNA Kit(DNase I)


包装规格:

2116A 通用植物RNA提取试剂盒(离心柱型)(DNase I) 50次 1290元
2116B 通用植物RNA提取试剂盒(离心柱型)(DNase I) 200次 4900元


本产品仅用于科研,禁止用于医药、临床医疗、食品和化妆品等用途。

产品介绍:
通用植物RNA提取试剂盒(DNase I),适用于水稻、玉米、小麦、拟南芥、番茄、烟草和一般多糖多酚如棉花、冬青等植物。可在40分钟左右,无需使用苯酚、氯仿等有机试剂,采用独特的裂解液可以迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,结合DNase Ⅰ可直接在柱上消化样品中残留DNA。可提取没有蛋白、细胞代谢物等杂质污染的高纯度、高质量的总RNA。 


可用于RT-PCR、Real Time PCR、Northern blot、Dot blot、poly A筛选、体外翻译、构建cDNA文库等各种分子生物学实验。

产品特点:
无污染:整套试剂盒采用RNase-Free处理。
特殊性:适用于提取植物组织的总RNA。
易操作:操作简便,提取过程仅需 40分钟左右。 
安全性:无需使用苯酚、氯仿等有机试剂。
吸附柱:含有特异性吸附柱。通过漂洗-离心-洗脱的步骤提取。
高质量:有效保证RNA的完整性,回收RNA 效率高,纯度高,没有蛋白和其他杂质污染。OD260/OD280的比值可达1.9~2.2,可用于各种分子生物学实验。

操作步骤:(实验前请先阅读注意事项) 
样品处理:
取 50~100 mg植物叶片在液氮中迅速研磨成粉末,加入1ml裂解液PRA,涡旋剧烈震荡混匀。注意:由于植物多样性非常丰富,而且同种植物的不同生长发育阶段和不同组织的RNA 含量都不相同,请根据具体实验情况选择合适的植物材料的用量。

提取步骤:
(可依照实验需求提前制备DNase I工作液,每一个样品取45μl DNase I buffer和5μl RNase free DNase I在离心管轻轻吹打混匀成工作液,可按照样品数量按比例制备工作液。)
1.将匀浆裂解液剧烈震动15~20秒,13,000rpm离心5~10分钟。会有杂质沉淀。
2.将上清液转入新的离心管中,加0.5倍体积的无水乙醇,立即吹打混匀。(不要吸取、沉淀物和漂浮物。漂浮物可能会黏附在枪头的外壁,注意不能将其带入离心管中。)
3.将混合溶液(每次小于720μl)转入套有吸附柱RA的离心管中,13,000 rpm离心2分钟,弃掉废液。
4.加350μl 去蛋白液RW1,室温放置1分钟,13,000rpm 离心30秒,弃掉废液。
5.向吸附柱RA 膜中央加入50μl 的DNase I 工作液(45μl DNase I buffer和5μl RNase-free DNase I),室温下放置15 分钟。
6.加入350μl去蛋白液RW1, 12,000 rpm 离心30秒 ,弃废液。
7.加入500μl漂洗液RW(请先检查是否已加入无水乙醇),13,000 rpm 离心30秒,弃掉废液。
8.重复步骤7一次。
9.将吸附柱RA放回收集管中,13,000 rpm离心2分钟,尽量除去漂洗液,以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
10.取出吸附柱RA(避免吸附柱RA的底部碰到收集管里面的废液),放入新的RNase-free离心管中,在吸附膜的中间部位加30 ~ 50μl  RNase-free H2O室温静置1分钟,12,000 rpm 离心1分钟。取得RNA后,将RNA溶液保存在-80°C,防止降解。


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qPCR实验流程图

送样要求:

1. 细胞(≥106 )、新鲜动植物组织(≥300mg)、血液(≥1ml)、叶片(≥100mg)等样品材料,基因组DNA或总RNA(总RNA>2μg,体积≥20μl,浓度≥100 ng/μl)。
2. 靶基因信息和背景资料:基因序列或GenBank Accession Number等,生物物种信息(Human、Mouse、Rat 等)、DNA/RNA 来源、基因丰度等。

提供服务:
引物探针设计合成,RNA提取,反转录,RNA电泳,引物筛选,上机定量检测。

提交结果:
原始数据(CT值和各种统计值,融化温度图,扩增曲线图,电泳图,柱状图)、数据分析结果及详细实验报告。