RNase清除剂(RNaseErasol) RNase Spray Eraser
RNaseErasol Reagent
一.试剂盒组成、储存、稳定性:
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Contents
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Storage
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R2134-1
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R2134-5
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1 mL
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5 mL
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RNaseErasol
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–20°C
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1 mL
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5 mL
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二.产品简介:
液体RNase清除剂(RNaseErasol)为20 x浓缩液,用于制备RNA悬浮液,可加入到各种RNA溶液或者反应缓冲液中,还能用于DEPC不能处理的含氨基的溶液,如Tris、MOPS 等,灭活可能存在的微量RNase无染,以增进RNA稳定性,获得更佳实验结果。
RNaseErasol不能逆转既有降解情况,但会阻止 RNA 进一步降解。该产品方便易用, 无致癌性的DEPC替代品(DEPC处理无法消除处理后引入的RNase污染),将溶液样品简单加热至60℃处理10分钟,处理过的RNA溶液可反复加热以消除新引入的任何RNase污染,处理后溶液不需高压灭菌(不同于DEPC 处理)。不影响逆转录酶,RNA聚合酶和耐热DNA聚合酶的活性,与各种下游程序兼容,如体外转录,逆转录、RNA 合成,探针制备,RT-PCR 等。
三.产品特点:
1.灭活溶液中RNase,60℃加热10分钟,可反复加热以消除新引入的任何RNase污染;
2.适合于各种缓冲液,包括不能用DEPC 处理的Tris 及MOPS 等缓冲液;
3.不影响逆转录酶,RNA聚合酶和耐热DNA聚合酶的活性,与各种下游程序兼容;
4.处理后溶液不需高压灭菌(不同于DEPC 处理);
5.方便易用, 无致癌性的DEPC替代品,DEPC处理无法消除处理后引入的RNase污染;
四.产品用途:
适用于制备RNA悬浮液,可加入到各种RNA溶液或者反应缓冲液中,还能用于DEPC不能处理的含氨基的溶液,如Tris、MOPS 等,灭活可能存在的微量RNase无染,以增进RNA稳定性,获得更佳实验结果。
五.储存条件及有效期:
储存条件:RNA样品储存液-20℃保存;加RNA样品重悬后-80℃冻存。
有效期:4℃运输,–20℃有效期12个月。
六.使用方法 :
1.在待处理的溶液或反应液中,加入1/20 体积的20 x RNaseErasol,如95μL 待处理溶液加5μL 20 x RNaseErasol。
2.如果用于溶解提取或纯化的RNA 样品,比如用于溶解Trizol抽提晾干的RNA,需先用超纯水将20 x RNaseErasol稀释到终浓度为1 x工作液后预热至60℃,然后直接用于溶解RNA(注意:稀释后的RNaseErasol不建议长期保存,最好现配现用)。
3.60℃处理10 分钟能使可能存在的微量RNase失活。
4.冷却至室温即可使用,置于-20℃短期保存或-80℃长期保存。
5.处理过的溶液随时可以60℃再处理10分钟,以去除任何可能发生的后续RNase 污染。
6.对60℃处理敏感的酶如逆转录酶、RNA多聚酶应在60℃处理冷却后再加入。
7.如果溶液中有不能用60℃处理的样品,也可以用37℃处理20 分钟,但最多只能灭活50 ng/mL的RNase。
七.相关资料:
1.本产品溶解RNA 比用RNase-free 水溶解更好,可以灭活RNA 中残留的RNase,而RNase-free 水不能。
2.RNA 在DEPC-treated water 和RNase-free water 中分别在37℃保温1 小时和24 小时,结果在DEPC-treated water 中保温24 小时的RNA 降解,而在RNase-free water 中的RNA 没降解,证明DEPC-treated water ≠RNase-free water(来于Millipore)。
3.RNase inhibitor一种特异性核糖核酸酶(RNase)抑制剂,原理是与RNase以非共价键结合形成复合体,导致RNase失活。但它本身是蛋白质,容易变性。另外它的活性还依赖于还原剂DTT,而DTT 在水中就十分容易失活(水中和空气中有氧气),所以长期保存时RNase inhibitor会逐渐失活并释放出已经结合的RNaseA, 反而使RNA 分子更容易降解。
4.在RNase-free 的溶液里RNA一样会被降解,RNA除了被RNase 降解外,RNA 分子在有二价金属离子(如Mg²+)存在时,或在高于65℃条件下,或在pH 高于9 或低于6 的环境里都会发生降解。在Tris 和硼酸缓冲液中,在中性pH 和常温下都会发生降解。
八.注意事项及安全提示:
1.本产品仅供科研使用。使用前请仔细阅读说明书,严格按照说明书操作。违反或者未按说明书进行操作可能导致错误结果。
产品应依照说明书要求,储存于合适的环境和温度下,并在有效期内使用,储存不当或产品过期可能导致错误结果。