产品中心

磁珠法禽类血液基因组DNA提取试剂盒
MagBeads gDNA Extraction Kit for Poultry Blood

包装规格：

MA1606-50	磁珠法禽类血液基因组DNA提取试剂盒	50T
MA1606-100	磁珠法禽类血液基因组DNA提取试剂盒	100T
MA1606-200	磁珠法禽类血液基因组DNA提取试剂盒	200T
MA1606-32	磁珠法禽类血液基因组DNA提取试剂盒(预封装)	32T
MA1606-96	磁珠法禽类血液基因组DNA提取试剂盒(预封装)	96T

备注：新货号MA1606，旧货号MD2506。

【重要声明】本产品仅用于科研领域，不用于临床诊断或治疗。使用前请仔细阅读本说明书，并严格按照操作步骤进行实验。

一.试剂盒组成、储存、稳定性：

Contents	Storage	MA1606-50	MA1606-100
		50T	100T
Buffer TL	RT	21 mL	42 mL
Proteinase K(20mg/mL)	-20℃	1 mL	2 mL
Buffer CB	RT	21 mL	42 mL
Buffer DW1	RT	31 mL	62 mL
Buffer DW2	RT	15 mL	30 mL
	RT	45 mL	90 mL
Buffer IR	RT	2 mL	4 mL
Buffer EB	RT	5 mL	10 mL
MagBeads	4℃	1 mL	2 mL

备注：
1. Buffer DW2第一次使用前按说明加指定量乙醇；
2. MagBeads 保存温度4-8℃冷藏，避免冷冻，实验开始前将MagBeads静置到室温，使用前需充分振荡至分散均匀。

二.保存条件：
本试剂盒在室温(15°C-25°C)干燥条件下可保存12个月，Proteinase K (20mg/mL)需单独-20℃低温保存。

三.自备试剂与设备：
无水乙醇，超纯水等；
漩涡振荡器、恒温水浴锅(或金属浴)、磁力架、离心机、吸头、移液器、离心管等；

四.产品简介：
本试剂盒基于功能性生物磁珠的特异性吸附原理，通过优化的缓冲液系统，实现从禽类全血样本中快速分离纯化高质量基因组DNA。磁珠在高盐条件下选择性结合核酸，低盐条件下释放核酸，整个过程无需酚、氯仿等有毒有机试剂，操作安全便捷。提取的基因组DNA片段完整、纯度高，可直接用于PCR、荧光定量PCR、基因测序、酶切、Southern杂交等下游分子生物学实验。

五.产品特点：
1.高效快速：整个实验流程1小时内完成，无需长时间离心或沉淀；
2.安全无毒：替代传统酚/氯仿抽提，操作过程安全，对环境友好；
3.纯度优异：提取的DNA A260/A280比值1.7-1.9，无蛋白、RNA污染，可直接用于PCR、测序等实验用途；
4.通用性强：兼容禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血液等多种样本类型，无需更换试剂盒；
5.结果稳定：磁珠批次间吸附量差异极小，提取的 DNA 得率和纯度重复性好，实验结果可靠。

六.适用范围：
适用于快速提取禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血液基因组DNA。

七.注意事项：
1.样本处理需在超净台或生物安全柜中进行，穿戴防护衣物、手套和口罩，避免样本交叉污染。
2.Buffer TL低温时可能出现沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
3.磁珠在使用前需在旋涡振荡器上充分混匀。如使用工作站提取，磁珠吸取需在振荡器上进行，或每次吸取前进行吹打。且一次吸取的磁珠必须一次放掉，不可对一次吸取的磁珠进行分液。
4.洗涤步骤中，去除上清时枪头需贴近液面但避免接触磁珠，防止磁珠流失；洗涤后需确保乙醇完全挥发(观察磁珠表面无反光或裂隙)，但避免磁珠过度干燥(易导致DNA洗脱不完全)。
5.样本应避免反复冻融，否则会导致DNA片段断裂和提取量下降；洗脱液建议65℃预热，可提高DNA回收率。
6.所有耗材（离心管、枪头）需无菌无核酸酶，实验台面和移液器定期消毒。

八.操作步骤：(实验前请先阅读注意事项)

实验前准备：Buffer DW2 按瓶身标签加入指定量无水乙醇！

1.处理血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血液，其红细胞为有核细胞，血液处理量只需加入50 µL。

2.加入20 µL Proteinase K(20mg/mL)溶液，再加入400 µL Buffer TL，立刻涡旋振荡，充分混匀。

3.在70℃水浴10-15 min直至溶液变清亮（但颜色偏黑色）。
可选步骤，一般不需要: 如果RNA残留较多，需要去除RNA，可以在加入Buffer TL前加20 µL RNase A(25mg/mL)溶液，振荡混匀，室温放置5-10 min。

4.加入40 μL Buffer IR，颠倒混匀30s，在冰上静置3分钟，13,000 rpm 4℃离心5 min，吸取上清液400 μL到新的1.5 mL离心管中。

5.实验开始前将磁珠静置平衡到室温，MagBeads使用前需充分振荡至分散均匀，向含上清液离心管中加入20 μL MagBeads，再加入400 μL Buffer CB，数次颠倒混匀，或者使用移液器吹打至磁珠分散均匀，室温静置10分钟，期间每隔 2 分钟混匀一次，保持磁珠处于悬浮状态。

6.将离心管移至磁力架上静置2 min，待磁珠完全吸附后，吸弃上清。

7.加入600 μL DW1，移开磁力架，数次颠倒混匀，或者使用移液器吹打至磁珠分散均匀，再将离心管移至磁力架上静置2 min，待磁珠完全吸附后，小心吸弃全部上清。

8.加入600 μL DW2，移开磁力架，数次颠倒混匀，将离心管置于磁力架上，反复颠倒磁力架，静置磁力架磁吸2 min，待磁珠完全吸附后，小心吸弃全部上清。该洗涤操作重复1次。

9.打开离心管盖，将离心管置于磁力架上，室温开盖干燥 5 ~10 min 至无乙醇残留（避免磁珠过度干燥，以免影响核酸得率）。

10.移去磁力架，向1.5 mL离心管中加入50-100 μL洗脱液Buffer EB，使用移液器轻轻吹打至磁珠分散均匀，56℃水浴5 ~10 min。

11.将离心管置于磁力架上，直至磁珠完全吸附，吸取含DNA上清液至新的Nuclease-free 1.5 mL离心管中，即得到高纯度的基因组DNA。

12.DNA可以存放在2-8℃，如果要长时间存放，可以放置在－20℃。

九.FAQ问题与解决方法：

问题	评论与建议
DNA 产量低	1样本量不足或样本质量差，使用新鲜采集的血液样本。
	2.磁珠未充分混匀，使用前充分涡旋磁珠悬浮液，确保磁珠均匀分散。
	3.结合时间不足，延长结合时间至 15 分钟。
	4.洗脱不充分，增加洗脱液体积；延长 56℃孵育时间至15分钟。
	5.磁珠过度干燥，缩短干燥时间至 5 分钟。
DNA 纯度低	1.蛋白质残留，增加裂解时间至 30 分钟；确保洗涤步骤充分。
	2.盐离子残留，增加洗涤液 DW2 的洗涤次数。
	3.乙醇残留，延长干燥时间至 10 分钟。
DNA 降解	1.样本采集后保存不当，样本采集后尽快提取，或 - 20℃冻存。
	2.操作过于剧烈，避免过度涡旋，轻柔操作。
磁珠团聚	1.磁珠保存不当，2-8℃保存，使用前充分涡旋混匀。
	2.缓冲液温度过低，所有缓冲液使用前室温平衡。
下游 PCR 反应失败	1.DNA 中存在抑制剂，增加洗涤次数；用洗脱液稀释 DNA 后使用。
	2.乙醇残留，确保干燥步骤充分。
	3.DNA 浓度过低，减少洗脱体积，浓缩 DNA。