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GeneGreen(GelGreen)核酸染料

GeneGreen(GelGreen)核酸染料(10,000×水溶液)​

产品编号:8101A

产品规格:500ul

产品价格:580

包装:

储存条件:C/RT

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GeneGreen(GelGreen)核酸染料(10,000×水溶液)

可见光透射仪或紫外透射仪下观测


GeneGreen是一种结合于所有dsDNA双螺旋小沟区域的具有独特涉及的荧光染料。在游离状态下侧链、CeneGreen发出微弱的荧光,但一旦与双链DNA结合后,荧光大大增强,因此CeneGreen的荧光信号强度与双链DNA的数量相关,可以根据荧光信号检测出PCR体系存在的双链DNA数量。


产品特点:
1.无毒性:CeneGreen 独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内,艾姆斯氏试验结果也表明,该染料的诱变性远小于EB。
2.灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。
3.稳定性高:适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶;室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定,耐光性强。
4.信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。 
5.操作简单:在预制胶和电泳过程中染料不降解;而电泳后染色过程也只需 30 分钟且无需脱色或冲洗,即可直接用可见光凝胶透射仪观察。
6.适用范围广:可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳;可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。 
7.与标准凝胶成像系统以及可见光激发的凝胶观察装置完美兼容:适用于使用254nm 激发的紫外凝胶成像系统或可见光激发的凝胶观察装置。

储存条件及有效期:    
4℃避光可保存12个月。

操作步骤:
1.胶染法(用法同EB)(推荐方法)
1.1 制胶时加入CeneGreen 核酸染料。(例如:每50mL 琼脂糖溶液中加入5μL CeneGreen 10,000× 储液,以此比例类推)。
1.2 按照常规方法进行电泳。
注意事项:
1. 此方法染色染料用量相对较少。500 μL染料大约可以做100块 50mL的胶。
2. 由于CeneGreen 具有良好的热稳定性,可以在热的琼脂糖溶液中直接添加,而不需要等待溶液冷却。摇晃,振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将CeneGreen 储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。CeneGreen 兼容所有常用的电泳缓冲溶液。
3. 如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度;选用更长的凝胶;延长凝胶时间以保证边缘清晰;改进上样技巧或选择泡染法染色。
4. 此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。

2.泡染法:
2.1 按照常规方法进行电泳。 
2.2 用H2O将CeneGreen 10,000× 储液稀释约3,300倍到0.1M NaCl中,制成3× 染色液。(例如将15μL CeneGreen 10,000× 储液和5mL 1M NaCl加到45mL H2O中)。
2.3 将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙烯容器中。缓慢加入足量的3× 染色液浸没凝胶。室温振荡染色30min左右。
注意事项:
1.用泡染法染色时,染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用3次左右。
2.3× CeneGreen 染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。

几种核酸染料比较:

名称

特性

安全性

适用性

GeneRed/

GelRed

灵敏度:

1.是一种独特的油性大分子,不易挥发升华,不易吸入人体,不能穿透细胞膜进入活体细胞内,安全无毒。

2.艾姆斯氏测试结果表明,GeneRed在凝胶染色浓度下完全没有诱变性,因此完全没有致癌毒性。

通用大小片段电泳染色,与EB有相同的光谱特性,无需改变滤光片及观察装置。标准的EB滤光片或SYBR滤光片都适用,使用普通紫外凝胶透射仪观察即可,在300nm紫外光附近可得到最佳激发。

稳定性:

DNA迁移的影响:

条带不弯曲,DNA片段不迁移。

GeneGreen/

GelGreen

灵敏度:

1.是一种独特的油性大分子,不易挥发升华,不易吸入人体,不能穿透细胞膜进入活体细胞内,安全无毒。

2.艾姆斯氏测试结果表明,GeneGreen在凝胶染色浓度下完全没有诱变性,因此完全没有致癌毒性。

通用大小片段电泳染色,适用于使用254nm激发的紫外凝胶透射仪或可见光凝胶透射仪观察。

稳定性:

DNA迁移的影响:

条带不弯曲,DNA片段不迁移。

SYBR Green I

灵敏度:

属花菁染料,能透过细胞膜进入活体细胞内,但容易生物降解,不会在体内残留,安全无毒。

100bp以上电泳染色,适用于使用254nm激发的紫外凝胶透射仪或可见光凝胶透射仪观察。

稳定性:

染料浓度较高时,条带容易弯曲,DNA片段迁移的现象明显。

EB

灵敏度:

1.分子量小,易挥发升华,易吸入人体,不易生物降解,在体内长期残留。

2.艾姆斯氏测试结果表明,EB容易引起有机体突变,是一种强诱变剂,具有高致癌性。

100bp以上电泳染色,背景荧光信号高;使用普通紫外凝胶透射仪观察。

稳定性:

DNA迁移的影响:

条带不弯曲,DNA片段不迁移。

Goldview

灵敏度:

1.主要成分为吖啶橙,是一种煤焦油提取物,具有高毒,致癌,高诱变性。

2.易挥发升华,易吸入人体,能穿透细胞膜进入活体细胞内,不易生物降解,在体内长期残留。

100bp以上电泳染色,背景荧光信号高;适用于使用254nm激发的紫外凝胶透射仪或可见光凝胶透射仪观察。

稳定性:

DNA迁移的影响:

条带不弯曲,DNA片段不迁移。


注意事项及安全提示:
1.如果您使用的是紫外成像仪,请选择GeneRed;如果您使用激光成像仪或希望在可见光下观测,请选择GeneGreen。
2.在极少数情况下,质粒经某些酶切后的DNA样品会出现拖尾和分辨率降低,此时建议同时尝试两种染色方法以决定哪种方法更加合适。




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