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深加工食品基因组DNA提取试剂盒(离心柱型)

Processed Food DNA Extraction Kit(SpinColumn)

包装规格：

一、产品简介：
独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解材料和灭活细胞内核酸酶，然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤， 抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。

二、产品特点：
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用优质特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小。
2.不需要使用有毒的苯酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
3.快速，简捷，单个样品操作一般可在30分钟内完成。
4.多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.7～1.9，长度可达30kb -50kb，可直接用于PCR，Southern-blot和各种酶切反应。

三、适用范围：
适用于快速提取各种深加工食品的基因组DNA提取。

四、操作步骤：
提示：
第一次使用前请先在漂洗液Buffer WB中加入指定量无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
平衡液预处理吸附柱备用：使用平衡液预处理硅胶膜吸附柱为必做步骤，具体方法参见前文“关于平衡液的使用”。

1.取50 mg样品（例如奶粉，饼干等食品）放入1.5 mL离心管，然后加入200 μL缓冲液Buffer BB重悬。
如果后期提取效果不理想，可以加倍处理样品至100-200mg,所用的试剂也要对应比例的加倍。

2.加入20 μL蛋白酶K (20mg/mL)溶液，充分混匀，65℃水浴30 min。

3.加入220 μL结合液Buffer CB，充分混匀，65℃水浴10 min。

4.13,000 rpm离心3-5 min,吸取上清至新的离心管中，大约400 μL。

5.加入上清一半体积的无水乙醇，约200 μL，立刻涡旋振荡充分混匀，此时可能会出现絮状沉淀。

6.将上一步混合物（包括可能有的沉淀）加入一个吸附柱Spin AC（吸附柱放入收集管中）中，13,000 rpm离心30-60秒，倒掉收集管中的废液。

7.加入500 μL抑制物去除液Buffer IR，12,000 rpm离心30秒，弃废液。 

8.加入600 μL漂洗液Buffer WB（请先检查是否已加入无水乙醇!），12,000 rpm离心30秒，弃掉废液。

9.加入600 μL漂洗液Buffer WB，12,000 rpm离心30秒，弃掉废液。

10.将吸附柱Spin AC放回空收集管中，13,000 rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液，以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。

11.取出吸附柱Spin AC，放入一个干净的离心管中，在吸附膜的中间部位加100 μL洗脱缓冲液Buffer EB（洗脱缓冲液事先在65-70℃水浴中预热效果更好），室温放置3-5分钟，12,000 rpm离心1分钟。将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，室温放置2分钟，12,000 rpm离心1分钟。
洗脱体积越大，洗脱效率越高，如果需要DNA浓度较高，适当减少洗脱体积，但是最小体积不应少于50 μL，体积过小降低DNA洗脱效率，减少DNA产量。

12.DNA可以存放在2-8℃，如果要长时间存放，可以放置在－20℃。