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磁珠法病毒DNA提取试剂盒
MagBeads gDNA Extraction Kit for Viral

MA1623-50	磁珠法病毒DNA提取试剂盒	50T	840元
MA1623-100	磁珠法病毒DNA提取试剂盒	100T	1510元
MA1623-200	磁珠法病毒DNA提取试剂盒	200T	2720元
MA1623-32	磁珠法病毒DNA提取试剂盒(预封装)	32T	840元
MA1623-64	磁珠法病毒DNA提取试剂盒(预封装)	96T	2020元

备注：新货号MA1623，旧货号MD2523。

【重要声明】本产品仅用于科研领域，不用于临床诊断或治疗。使用前请仔细阅读本说明书，并严格按照操作步骤进行实验。

一.试剂盒组成、储存、稳定性：

Contents	Storage	MA1623‑50	MA1623‑100
		50T	100T
Buffer DLB	RT	20 mL	40 mL
Buffer CB	RT	31 mL	62 mL
Buffer DW1	RT	31 mL	62 mL
Buffer DW2	RT	15 mL	30 mL
	RT	45 mL	90 mL
Buffer EB	RT	5 mL	10 mL
MagBeads	4℃	1 mL	2 x 1 mL

备注：
1. Buffer DW2第一次使用前按说明加指定量乙醇；
2. MagBeads 保存温度4‑8℃冷藏，避免冷冻，实验开始前将MagBeads静置到室温，使用前需充分振荡至分散均匀。

二.保存条件：
本试剂盒在室温(15°C‑25°C)干燥条件下可保存12个月，MagBeads 磁珠单独 4~8℃冷藏保存，严禁冷冻。所有缓冲液使用后及时盖紧瓶盖，防止挥发、氧化导致 pH 值变化。

三.自备试剂与设备：
无水乙醇，0.9% NaCl 溶液，1 × PBS缓冲液(pH7.4)，超纯水；
漩涡振荡器、恒温水浴锅(或金属浴)、磁力架、离心机、吸头、移液器、离心管等；

四.产品简介：
本试剂盒基于功能性生物磁珠的特异性吸附原理，通过优化的缓冲液系统，实现从无细胞体液中快速分离纯化高纯度病毒基因组 DNA。磁珠在高盐条件下选择性结合核酸，低盐条件下释放核酸，整个过程无需酚、氯仿等有毒有机试剂，操作安全便捷。提取的基因组DNA片段完整、纯度高，可直接用于PCR、荧光定量PCR、基因测序、酶切、Southern杂交等下游分子生物学实验。
病毒经裂解液裂解后，通过去蛋白液去除蛋白杂质，磁珠与病毒 DNA 充分结合后，经洗涤去除盐、细胞代谢物等干扰物，最终通过洗脱液获得纯净的病毒 DNA。纯化后的病毒核酸无杂质和 PCR 抑制剂，片段完整、质量稳定，可直接用于 PCR、荧光定量 PCR、酶切、核酸杂交等下游分子生物学实验，适用于 HBV（乙肝病毒）、CMV（巨细胞病毒）等多种病毒 DNA 的提取。

五.产品特点：
1.高效快速：单个样品全程操作30分钟内完成，无需长时间离心或沉淀，大幅提升实验效率；
2.安全无毒：替代传统酚/氯仿抽提，操作过程安全，对环境友好；
3.纯度优异：提取的DNA A260/A280比值1.7‑1.9，无蛋白、RNA污染，可直接用于高通量测序等高端实验；
4.吸附稳定：磁珠批次间吸附效果均一，无明显差异，提取结果重复性好；

六.适用范围：
适用于从无细胞体液，包括血浆、血清、腹水、培养细胞上清液、脑脊髓液及尿液等样品中快速提取病毒基因组DNA。

七.注意事项：
1.样本处理需在超净台或生物安全柜中进行，穿戴防护衣物、手套和口罩，避免样本交叉污染；
2.磁珠悬液使用前需充分振荡10‑15秒，确保磁珠均匀分散；
3.吸取磁珠时避免枪头触碰管壁，防止磁珠吸附残留；每次振荡后需瞬时离心(3000rpm，5秒)，将管壁和管盖的液体收集至管底；
4.洗涤步骤中，去除上清时枪头需贴近液面但避免接触磁珠，防止磁珠流失；洗涤后需确保乙醇完全挥发(观察磁珠表面无反光或裂隙)，但避免磁珠过度干燥(易导致DNA洗脱不完全)；
5.样本应避免反复冻融，否则会导致DNA片段断裂和提取量下降；洗脱液建议65℃预热，可提高DNA回收率；
6.所有耗材（离心管、枪头）需无菌无核酸酶，实验台面和移液器定期消毒。

八.操作步骤：(实验前请先阅读注意事项)

实验前准备：Buffer DW2 按瓶身标签加入指定量无水乙醇！

1.取 200 μL 预处理后的体液样本（血清/血浆/上清液等）加入 1.5 mL 无菌离心管，不足 200 μL的，用PBS或无酶水补足至200 μL。
2.加入 400 μL 裂解液Buffer DLB，立刻涡旋振荡30秒充分混匀；室温 (15‑25℃) 放置 10 分钟，期间每隔5分钟振荡混匀1次，确保病毒完全裂解。
3.实验开始前将磁珠静置平衡到室温，MagBeads使用前需充分振荡至分散均匀，向含上清液离心管中加入20 μL MagBeads，再加入600 μL Buffer CB，数次颠倒混匀，或者使用移液器吹打至磁珠分散均匀，室温静置10分钟，期间每隔 2 分钟混匀一次，保持磁珠处于悬浮状态。
4.将离心管移至磁力架上静置2 min，待磁珠完全吸附后，吸弃上清。
5.加入600 μL DW1，移开磁力架，数次颠倒混匀，或者使用移液器吹打至磁珠分散均匀，再将离心管移至磁力架上静置2 min，待磁珠完全吸附后，小心吸弃全部上清。
6.加入600 μL DW2，移开磁力架，数次颠倒混匀，将离心管置于磁力架上，反复颠倒磁力架，静置磁力架磁吸2 min，待磁珠完全吸附后，小心吸弃全部上清。该洗涤操作重复1次。
7.打开离心管盖，37℃干燥箱干燥5‑10 min，或室温放置5‑10 min，使乙醇完全挥发（避免磁珠过度干燥，以免影响核酸得率）。
8.移去磁力架，向1.5 mL离心管中加入30~50μL洗脱液Buffer EB，使用移液器轻轻吹打至磁珠分散均匀，56℃水浴5‑10 min。
9.将离心管置于磁力架上，直至磁珠完全吸附，吸取含DNA上清液至新的Nuclease‑free 1.5 mL离心管中，即得到高纯度的基因组DNA。
10.DNA可以存放在2‑8℃，如果要长时间存放，可以放置在－20℃。

九.FAQ问题与解决方法：

问题	评论与建议
DNA产量低	1.样本量不足或样本质量差，使用新鲜采集的样本。
	2.磁珠未充分混匀，使用前充分涡旋磁珠悬浮液，确保磁珠均匀分散。
	3.结合时间不足，延长结合时间至 15 分钟。
	4.洗脱不充分，增加洗脱液体积；延长 56℃孵育时间至15分钟。
	5.磁珠过度干燥，缩短干燥时间至 5 分钟。
DNA纯度低	1.蛋白质残留，增加裂解时间至 20 分钟；确保洗涤步骤充分。
	2.盐离子残留，增加洗涤液 DW2 的洗涤次数。
	3.乙醇残留，延长干燥时间至 10 分钟。
DNA降解	1.样本采集后保存不当，样本采集后尽快提取，或‑20℃冻存。
	2.操作过于剧烈，避免过度涡旋，轻柔操作。
磁珠团聚	1.磁珠保存不当，2‑8℃保存，使用前充分涡旋混匀。
	2.缓冲液温度过低，所有缓冲液使用前室温平衡。
下游 PCR 反应失败	1.DNA 中存在抑制剂，增加洗涤次数；用洗脱液稀释 DNA 后使用。
	2.乙醇残留，确保干燥步骤充分。
	3.DNA 浓度过低，减少洗脱体积，浓缩 DNA。