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T4 DNA Ligase

产品编号:2609

产品规格:100U/300U

产品价格:120/300

包装:

储存条件:4℃

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T4 DNA Ligase

产品描述:

T4 DNA Ligase 是从表达T4 DNA Ligase 基因的大肠杆菌经诱导表后分离纯化而来的。它催化相邻DNA链的的5-磷酸末端和3羟基末端以磷酸二酯键结合反应。该酶催化平滑末端或粘性末端DNA的连接,修复双链DNARNADNA/RNA杂交中的单链中的单链切口。

浓度及储存温度:5u/ul;  -20℃保存(保存6个月)

适用范围:
(1)DNA片段和载体DNA快速连接;
(2)限制酶切片段的克隆;
(3)将DNA片段与Linker或Adaptor连接。


酶贮存缓冲液:
20mM Tris-HCl (pH7.5), 0.1 mM EDTA, 1mM DTT, 50 mM KCl, 50% glycerol。
10×Ligation Buffer:
400 mM Tris-HCl, 100 mM MgCl2, 100 mM DTT,5 mM ATP(PH7.8),其他成分。

建议连接反应体系:(以10ul反应体系为例
标准反应管 阳性对照管
Vector ul ul
PCR产物    n ul ** /
对照插入DNA片段 / 1ul
T4 DNA连接酶(5U/ml) 2~5U  2~5U
10×Ligation Buffer 1ul 1ul
加去离子水至终体积 10ul 10ul

反应循环的设置:

粘端连接:22oC反应10分钟(可根据需要延长到1小时);也可以16oC反应1-5小时。
平端连接:22oC反应2小时或16 oC过夜。