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Elispot检测服务

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ELISPOT就其原理来说实在是很简单的,从本质上说和ELISA的原理是一样的:细胞受到刺激后局部产生细胞因子,此细胞因子被特异单克隆抗体捕获。细胞分解后, 被捕获的细胞因子与生物素标记的二抗结合,其后再与碱性磷酸酶标记的亲和素结合。BCIP/NBT底物孵育后,PVDF孔板出现“紫色”的斑点表明细胞产生了细胞因子,通过ELISPOT酶联斑点分析系统对斑点的分析后得出结果.


检测特点:
ELISPOT是定量ELISA技术的延伸和新的发展,两者都是检测细胞产生的细胞因子或其他可溶性蛋白,它们最大的不同在于:
1、ELISA通过显色反应,在酶标仪上测定吸光度,与标准曲线比较得出定量的可溶性蛋白总量。
2、ELISPOT通过显色反应,在细胞分泌这种可溶性蛋白的相应位置上显现清晰可辨的斑点,可直接在显微镜下人工计数斑点或通过ELISPOT分析系统对斑点进行计数,1个斑点代表1个活性细胞,从而计算出分泌该蛋白或者细胞因子的细胞的频率。
3、由于是单细胞水平检测,ELISPOT比ELISA和有限稀释法等更灵敏,能从 20万-30万 细胞中检出1个分泌该蛋白的细胞。
4、捕获抗体为高亲和力、高特异性、低内毒素单抗,在研究者以刺激剂激活细胞时,不会影响活化细胞分泌细胞因子。 

检测优势:

1、灵敏度高,比传统的ELISA高100-1000倍

4、操作简单,通量高,经济实惠

2、特异性高

5、应用范围广

3、单细胞水平,能进行活细胞功能检测

6、实验周期短

 

应用范围:

1、疫苗研究开发

5、器官移植中排斥反应的预测

2、干细胞功能分析

6、细胞杂交瘤的筛选

3、自身免疫疾病的诊断、免疫治疗的监控和预后分析

7、基因治疗中转染效率的检测

4、化合物和药物免疫学反应的筛选

 

 

客户提供:
1、尽可能详细的背景资料。
2、实验样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等,邮寄前请与我公司技术支持沟通确认。
3、检测试剂盒(或购买我公司的检测试剂盒)。

注意事项:
1、客户收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。
2、对收集后当天进行检测的标本,储存在4 ℃备用。
3、对因特殊原因需要周期收集的标本,需将标本及时分装后放在-20 ℃或-70 ℃条件下保存,并避免反复冻融。
4、标本2-8 ℃可保存48小时,-20 ℃可保存1个月。-70 ℃可保存6个月。
5、部分激素类标本需添加抑肽酶。

最终提交结果:

完整的实验报告单,包括实验步骤、仪器试剂等信息。